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牛組胺(HIS)ELISA試劑盒分析方法

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牛組胺(HIS)ELISA試劑盒E操作注意事項如下:(1) 加樣:在ELISA中除了包被外,一般需進行4~5次加樣。在定性測定中有時不強調(diào)加樣量的準確性,例如規(guī)定為加樣1滴。此時應(yīng)該使用相同口徑的滴管,保持準確的加樣姿勢,使每滴液體的體積基本相同。在定量測定中則加樣量應(yīng)力求準確。標本和結(jié)合物的稀釋液應(yīng)按規(guī)定配制。加樣時應(yīng)將液體加在孔底,避免加在孔壁上部,并注意不可出現(xiàn)氣泡。

(2) 孵育:在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標本和加結(jié)合物后,此時反應(yīng)的溫度和時間應(yīng)按規(guī)定的要求,保溫容器水浴箱,可使溫度迅速平衡。各ELISA板不應(yīng)疊在一起。為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)⑵桨宸旁诘撞繅|有濕紗布的濕盒中。濕盒應(yīng)該是金屬的,傳熱容易。如用保溫箱,空濕盒應(yīng)預(yù)先放在其中,以平衡溫度,這一步驟在室溫較低時更為重要。加入底物后,反應(yīng)時間和溫度通常不做嚴格要求。

(3) 洗滌:洗滌在ELISA過程中雖不是反應(yīng)步驟,但卻是決定成敗的關(guān)鍵。洗滌的目的是洗去反應(yīng)中沒有與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。

(4)顯色及終止反應(yīng):顯色是酶促反應(yīng),應(yīng)按規(guī)定的溫度和時間操作,用酸終止。

(5) 結(jié)果判斷:用比色計測定結(jié)果,準確性決定于ELISA板底的平整與透明度和比色計的質(zhì)量。


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